四環曲霉酮類化合物及其制備方法和應用

文檔序號:8313187
四環曲霉酮類化合物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及曲霉酬類化合物,尤其是設及四環曲霉酬類化合物及其制備方法和應 用。
【背景技術】
[0002] 炎癥反應是機體免疫反應的一部分,是血管或組織對損傷或病原體等有害刺激的 局部反應。炎癥反應的主要癥狀有發熱、疼痛、腫脹、泛紅W及機體功能的喪失等,對患者的 生活質量有不同程度的影響。炎癥導致風濕性關節炎、炎癥性腸病、神經退化性疾病、脈毒 性休克、動脈粥樣硬化等疾病相關W,局部慢性炎癥反應還可誘發機體癌變
[0003] 目前,抗炎藥物的作用機制多種多樣,如阻斷與炎癥有關的前列腺素合成的關鍵 酶環加氧酶-2(COX-2)的作用,或抑制炎癥因子如腫瘤壞死因子-a、白細胞介素(IL)、一 氧化氮(NO)、自由基等毒性分子的誘導表達等。廣泛使用的抗炎藥主要分為兩類:一 種是非醬體抗炎藥(NSAIDs),如雙氯芬酸、布洛芬、嘲噪美辛、蒙普生等;另一種是C0X-2的 選擇性抑制劑昔布類,如塞來昔布、依托昔布等W。該兩類藥物在減輕炎癥病痛的同時,都 存在較強的副作用,如長期服用NSAH)s會導致腸胃糜爛或潰瘍W及各種屯、血管疾病W,昔 布類藥物對凝血功能和腎功能都有影響。
[0004] 天然產物是一類來源于動物、植物、微生物等生物體的次級代謝產物,因其復雜多 樣的化學結構W及各種各樣的生物活性,始終在新藥研發中占有舉足輕重的地位。海洋微 生物特殊的生存環境,為代謝多樣性提供了可能,因此是產生結構新穎、活性多樣的天然產 物的重要來源。海洋微生物代謝的天然產物,為開發新型治療效果好、毒副作用低的抗炎藥 物或其他生物活性藥物提供了重要資源。
[000引參考文獻:
[0006] 1. Maranhao, R. C. and A. C. A. Leite, Development of Anti-Atherosclerosis Therapy Based on the Inflammatory and Proliferative Aspects of the Disease[J]. Qirr. Pharm. Des. , 2015. 21 (9) :p. 1196-1204.
[0007] 2. Schwartsburd, P. M. , Chronic inflammation as inductor of pro-cancer microenvironment:Pathogenesis of dysregulated feedback control [J].Cancer Metastasis Rev. , 2003. 22(1) :p. 95-102.
[000引 3. Warner, T. D., et al., Nonsteroid drug selectivities for cyclo-oxygenase-lrather than cycl0-0xygenase-2are associated with human gastrointestinal toxicity:a full in vitro analysis[J]. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A .,1999. 96(13) :p. 7563-7568.
[0009] 4. Huang, X. -s. , et al. , Inhibitory effect of momordicin on inflammatory factors generation by preventing nuclear translocation of nuclear factor-kappa B[J].Zhongguo Dongmai Yin曲ua Zazhi, 2013. 21(7) :p. 583-588.
[0010] 5. Matsui, T. , et al. , Hypothermia at 35 °C Reduces the Time-D巧endent Microglial Production of Pro-inflammatory and Anti-inflammatory Factors that Mediate Neuronal Cell Death[J]. Neurocrit. Care, 2014. 20(2):p. 301-310.
[0011] 6. Shaikh, S. R. and G. M. Nazeruddin, Multi component reactions and non -steroidal anti -inflammatory drugs[J]. J. Chem. Pharm. Res. , 2014. 6(12):p. 505 -534, 3 0卵.
[0012] 7. A1 -Turki, D. A. , et al. , Therapeutic and toxic effects of new NSAIDs and related compounds:a review and prospective study[J]. Int. J. Pharmacol. , 2010. 6(6) :p. 813 - 825.

【發明內容】

[0013] 本發明的第一目的是提供曲霉(Aspergillus sp. )ZL(Ub-14。
[0014] 本發明的第二目的是提供四環曲霉酬類化合物及其制備方法。
[0015] 本發明的第=目的是提供四環曲霉酬類化合物有制備抗炎癥藥物中的應用。
[0016] 所述曲霉(Aspergillus sp. )ZL(Ub-14已于2014年12月26日保藏于中國典型 培養物保藏中屯、,地址;中國武漢武漢大學,郵編;430072,保藏中屯、保藏編號為CCTCC NO ; M 2014668。
[0017] 所述四環曲霉酬類化合物包括四個曲霉酬化合物,即四環曲霉酬A、四環曲霉酬 B、四環曲霉酬C和四環曲霉酬D ;
[001引四環曲霉酬A的分子式為〔22也09,分子量為434. 16,手性碳的絕對構型為5aS、6R、 6aR、10aR、llR、llaR ;
[0019] 四環曲霉酬B的分子式為〔22&8〇8,分子量為420. 18,手性碳的絕對構型為5aS、6R、 6aR、10aR、llR、llaR ;
[0020] 四環曲霉酬C的分子式為C21H24O9,分子量為420. 14,手性碳的絕對構型為5aS、6R、 6aR、10aR、llR、llaR ;
[0021] 四環曲霉酬D的分子式為化,分子量為436. 46,手性碳的絕對構型為5aS、6S、 6aR、10aR、llR、llaS、12R ;
[0022] 四環曲霉酬A、四環曲霉酬B、四環曲霉酬C和四環曲霉酬D的化學結構式如下;
[0023]
【主權項】
1. 曲霉(Aspergillus sp.)ZL01b-14,已于2014年12月26日保藏于中國典型培養物 保藏中心,保藏中心保藏編號為CCTCC NO :M 2014668。
2. 四環曲霉酮類化合物,其特征在于包括四個曲霉酮化合物,即四環曲霉酮A、四環曲 霉酮B、四環曲霉酮C和四環曲霉酮D ; 四環曲霉酮A的分子式為C22H26O9,分子量為434. 16,手性碳的絕對構型為5aS、6R、6aR、 IOaRU 1R> IlaR ; 四環曲霉酮B的分子式為C22H28O8,分子量為420. 18,手性碳的絕對構型為5aS、6R、6aR、 IOaRU 1R> IlaR ; 四環曲霉酮C的分子式為C21H24O9,分子量為420. 14,手性碳的絕對構型為5aS、6R、6aR、 IOaRU 1R> IlaR ; 四環曲霉酮D的分子式為C22H28O9,分子量為436. 46,手性碳的絕對構型為5aS、6S、6aR、 10aR、llR、llaS、12R ; 四環曲霉酮A、四環曲霉酮B、四環曲霉酮C和四環曲霉酮D的化學結構式如下:
3. 如權利要求2所述四環曲霉酮類化合物的制備方法,其特征在于包括以下步驟: 1) 制備馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂半海水培養基平板,將曲霉(Aspergillus sp. )ZL01b-14 轉接到馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂半海水培養基平板上,倒置培養得平板菌種; 2) 將步驟1)得到的平板菌種接種于馬鈴薯-葡萄糖半海水液體培養基中搖床培養,得 種子液; 3) 將步驟2)所得種子液轉接到發酵培養基中,倒置發酵后得發酵培養物; 4) 將步驟3)得到的發酵培養物用混合有機溶劑浸提,將提取液減壓濃縮至干,甲醇溶 解后過濾,濾液再減壓濃縮至干得浸膏,浸膏用乙酸乙酯和水萃取至乙酸乙酯相無色,收集 乙酸乙酯相減壓濃縮至干得粗提物浸膏,再用甲醇和石油醚萃取至石油醚相無色,收集甲 醇相減壓濃縮至膏狀,然后用甲醇溶解,過濾后再次減壓濃縮,得濃縮粗提物浸膏; 5) 將步驟4)得到的濃縮粗提物浸膏進行反相中壓液相柱層析,以甲醇/水連續梯度洗 脫得組分1和組分2,組分1經兩次凝膠柱層析和一次半制備型高壓液相色譜得四環曲霉酮 A和四環曲霉酮B ;組分2經一次凝膠柱層析和一次半制備型高壓液相色譜得四環曲霉酮C 和四環曲霉酮D。
4. 如權利要求3所述四環曲霉酮類化合物的制備方法,其特征在于在步驟1)中,所述 馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂半海水培養基的配制方法為:將去皮的馬鈴薯切成小塊,加水煮沸 20~40min,紗布過濾得馬鈴薯濾液,加入葡萄糖、瓊脂和半海水,加水定容至lOOOmL,滅菌 條件為121°C下滅菌20min;所述馬鈴薯濾液中葡萄糖與馬鈴薯的質量比可為1 : (10~ 20),所述瓊脂與馬鈴薯的質量比可為1 : (15~20)。
5. 如權利要求3所述四環曲霉酮類化合物的制備方法,其特征在于在步驟2)中,所 述馬鈴薯-葡萄糖半海水液體培養基的配制方法為:將去皮的馬鈴薯切成小塊,加水煮沸 20~40min,紗布過濾得馬鈴薯濾液,加入葡萄糖和半海水,加水定容至lOOOmL,滅菌條件 為121°C下滅菌20min;所述馬鈴薯濾液中葡萄糖與馬鈴薯的質量比可為1 : (10~20); 所述搖床培養的條件可為27~28°C,160~180rpm,培養的時間為4~6天。
6. 如權利要求3所述四環曲霉酮類化合物的制備方法,其特征在于在步驟3)中,所述 發酵培養基采用馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂-20 % NaCl培養基,馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂-20 % NaCl培養基的配制方法可為:將去皮的馬鈴薯切成小塊,加水煮沸20~40min,紗布過濾 得馬鈴薯濾液,加入葡萄糖、NaCl和瓊脂,加水定容至lOOOmL,滅菌條件為121°C下滅菌 20min,所述馬鈴薯濾液中的葡萄糖與馬鈴薯的質量比可為1 : (10~20),瓊脂與馬鈴薯的 質量比可為1 : (15~20),馬鈴薯與NaCl的質量比可為1 : (0.5~1.5)。
7. 如權利要求3所述四環曲霉酮類化合物的制備方法,其特征在于在步驟4)中,所述 混合有機溶劑采用乙酸乙酯/甲醇/甲酸,乙酸乙酯、甲醇、甲酸的體積比為80 : 15 : 5; 所述乙酸乙酯和水的體積比可為1 : 1,甲醇和石油醚的體積比可為1 : 1;各次減壓濃縮 的溫度均可為45°C。
8. 如權利要求3所述四環曲霉酮類化合物的制備方法,其特征在于在步驟5)中,所述 甲醇/水連續梯度洗脫的比例變化按體積比為0/100到100/0 ; 所述組分1經兩次凝膠柱層析和一次半制備型高壓液相色譜中的兩次凝膠柱層析可 采用Sephadex LH-20,洗脫劑分別為甲醇和丙酮/甲醇,丙酮與甲醇的體積比可為4 : 1, 一次半制備高壓液相色譜的洗脫條件可為60%甲醇; 所述組分2經一次凝膠柱層析和一次半制備型高壓液相色譜中的凝膠柱層析可采用 Sephadex LH-20,洗脫劑為丙酮/甲醇,丙酮與甲醇的體積比可為4 : 1,一次半制備高壓 液相色譜的洗脫劑可為45%甲醇。
9. 如權利要求2所述四環曲霉酮類化合物在制備抗炎癥藥物中應用;所述炎癥可包括 但不限于風濕性關節炎、炎癥性腸病、神經退化性疾病和膿毒性休克由促炎癥因子介導的 炎癥。
10. 如權利要求9所述應用,其特征在于所述抗炎癥藥物還包括以四環曲霉酮A、B、C 和D作為有效成分并含有常規藥用載體的藥物組合物。
【專利摘要】四環曲霉酮類化合物及其制備方法和應用,涉及曲霉酮類化合物。四環曲霉酮類化合物包括四環曲霉酮A、B、C和D。制備培養基平板,將曲霉轉接到平板上培養得平板菌種,再接種于液體培養基中得種子液;轉接到發酵培養基中得發酵培養物,浸提后濃縮至干,甲醇溶解后過濾,濾液濃縮至干得浸膏,再萃取至乙酸乙酯相無色,收集乙酸乙酯相濃縮至干得粗提物浸膏,再萃取至石油醚相無色,收集甲醇相濃縮至膏狀,用甲醇溶解,過濾后濃縮得濃縮粗提物浸膏,進行反相中壓液相柱層析,洗脫得組分1和2,組分1經兩次層析和一次半制備型高壓液相色譜得四環曲霉酮A和B;組分2經一次層析和一次半制備型高壓液相色譜得四環曲霉酮C和D。CCTCC NO: M 201466820141226
【IPC分類】A61P25-00, C12N1-14, C07D493-04, A61P1-00, C12R1-66, A61P29-00, A61K31-366, A61P19-02, C12P17-18
【公開號】CN104630078
【申請號】CN201510094280
【發明人】鄧賢明, 徐慶妍, 湛瑩, 亓雙, 王躍宙, 胡志鈺, 鄭忠輝, 宋思揚
【申請人】廈門大學
【公開日】2015年5月20日
【申請日】2015年3月3日
再多了解一些
網友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1
做爱视频