KCP基因在宮頸癌紫杉醇敏感性檢測中的應用的制作方法

文檔序號:18145658發布日期:2019-07-10 11:47
KCP基因在宮頸癌紫杉醇敏感性檢測中的應用的制作方法

本發明涉及生物醫學領域,具體涉及KCP基因的應用。



背景技術:

宮頸癌是危害全球女性健康的第四位常見惡性腫瘤。據2012年統計,全球每年宮頸癌新發病例53萬,新增死亡病例27萬。我國是新發病例和死亡病例最多的國家,每年新發病例達13.15萬,新增死亡人數約5.3萬,占我國女性惡性腫瘤死亡人數的18.4%。在不發達國家宮頸癌5年生存率不高<50%,尤其是Ⅲ-Ⅳ期,其生存率僅為5%-15%,宮頸癌嚴重威脅女性生命。雖然多年來擁有完善的宮頸癌篩查體系,可以早發現,早治療。但是,基于我國國情,直至目前近一半宮頸癌患者就診時已為中晚期,并有年輕化趨勢。

紫杉醇(Paclitaxel)為基礎一線化療應用于所有中晚期宮頸癌患者,對紫杉醇不敏感的宮頸癌患者,會導致五年生存率降低20%-30%,紫杉醇作為一線藥物治療中晚期宮頸鱗癌患者敏感率為57.7%-80%,腺癌81%;而作為二線藥物或者單藥化療藥物,其總敏感率為20%-40%。美國和日本研究報道,對于局部晚期宮頸癌患者,20%患者對紫杉醇為基礎新輔助化療不敏感而導致治療失敗。

目前尚未發現特異性評估紫杉醇敏感性的標志物,若對紫杉醇不敏感宮頸癌患者進行試驗性化療,增加患者經濟費用和化療副反應,甚至導致疾病進展。因此,尋找評估紫杉醇是否敏感特異標志物,篩查出哪些患者會在紫杉醇為基礎化療中獲益,哪些會導致耐藥,對改善患者預后及延長患者生命尤為重要。



技術實現要素:

本發明通過全基因組CRISPR/Cas9-Pool文庫篩選技術在宮頸癌SiHa細胞中篩選出紫杉醇的潛在增敏基因,通過混合sgRNA靶點進行增殖抑制效應實驗與化療敏感性協同系數統計。高內涵篩選方法找到了7個潛在的增敏基因,進一步通過單靶點驗證實驗,發現Kielin/chordin樣蛋白(Kielin/chordin-like protein,KCP)基因敲除后能夠實現紫杉醇的增敏效應,KCP單靶點(05002-1)增敏倍數最高。通過功能試驗證明,敲除KCP基因增加SiHa細胞對紫杉醇敏感性,主要表現為抑制細胞增殖和克隆。

根據本發明,提供一種宮頸癌紫杉醇治療敏感性標志物,所述標志物為KCP基因,KCP基因序列如SEQ ID NO:1所示,KCP基因作為標志物用于評價宮頸癌患者對紫杉醇的藥物敏感性。

根據本發明,提供一種宮頸癌紫杉醇治療敏感性標志物的篩選方法,該方法包括以下步驟:

(1)全基因組CRISPR/Cas9敲除技術篩選SiHa細胞中紫杉醇化療增敏基因,選擇倍數變化FC、貝葉斯因子BF滿足以下篩選條件的基因作為候選基因:

在藥物組中FCPaclitaxel≤-2,在對照組中|FCDMSO|<2;并且

在藥物組中BFPaclitaxel>2,在對照組中BFDMSO<0;

(2)高內涵篩選單靶點敲除后增加紫杉醇化療敏感性基因,針對上述步驟(1)篩選出的候選基因,每個基因6個靶點,選擇在4ng/mL紫杉醇作用下增敏倍數大于1.5的sgRNA靶點為陽性靶點;

(3)針對上述步驟(2)篩選出的基因靶點,通過細胞毒實驗MTT法檢測紫杉醇給藥后的增殖抑制率、細胞克隆能力和細胞凋亡率,滿足以下篩選條件中的任意兩者或兩者以上的即為宮頸癌紫杉醇敏感性相關基因靶點:

增殖抑制率顯著增強,細胞克隆能力顯著減弱,細胞凋亡率顯著升高。在根據本發明的一種實施方式中,上述“顯著增強”、“顯著減弱”、“顯著升高”的判斷標準為統計分析中與對照組相比P<0.05。

根據本發明,提供一種KCP基因在制備宮頸癌紫杉醇治療敏感性檢測產品中的應用,其中,所述檢測產品為檢測試劑或檢測試劑盒。宮頸癌紫杉醇治療敏感性檢測試劑包括KCP基因序列完整性檢測試劑和/或KCP基因表達產物檢測試劑。宮頸癌紫杉醇治療敏感性檢測試劑盒包括上述宮頸癌紫杉醇治療敏感性檢測試劑。上述檢測產品通過檢測KCP基因的序列完整性或者KCP基因的表達產物來評估受試宮頸癌患者對紫杉醇藥物化療的敏感性,從而據此判斷該宮頸癌患者對紫杉醇藥物化療的適用性。

上述KCP基因序列完整性檢測試劑包括但不限于檢測KCP基因突變位點的引物、探針和其他所需試劑。

根據本發明,提供一種宮頸癌紫杉醇治療敏感性檢測試劑盒,所述試劑盒包括KCP基因序列完整性檢測試劑和/或KCP基因表達產物檢測試劑。

根據本發明,提供一種組合物,該組合物包括紫杉醇和KCP抑制劑,所述KCP抑制劑包括KCP基因表達抑制劑和/或KCP受體阻斷劑。所述KCP抑制劑通過抑制KCP基因的表達和/或阻礙KCP蛋白發揮作用而提高紫杉醇治療敏感性,從而與紫杉醇發揮協同作用。本發明提供的上述組合物用于宮頸癌治療,可以單獨使用,也可以配合放療使用。

本發明提供的上述技術方案均基于KCP基因與宮頸癌紫杉醇治療敏感性之間的關聯,KCP基因作為特異性的宮頸癌紫杉醇治療敏感性標志物,填補了該領域長久以來的技術空白,不僅提供了宮頸癌紫杉醇藥物敏感性檢測靶點,有助于預先評估宮頸癌患者對于紫杉醇化療的效果,還提供了配合宮頸癌放療、化療及手術治療的新靶點。本發明提供的宮頸癌紫杉醇治療敏感性檢測試劑盒能夠預先評估宮頸癌患者對紫杉醇化療的受益程度和耐藥情況,對改善患者預后及延長患者生命尤為重要。本發明提供的宮頸癌治療組合物通過KCP抑制劑對紫杉醇敏感性的增強來大大提高紫杉醇化療效果,有助于宮頸癌的治療。在治療之前檢測宮頸癌患者是否對紫杉醇藥物敏感,將大大有利于后續治療方案的選擇。

附圖說明

圖1示出實施例1中紫杉醇差異候選基因相對sgRNA在紫杉醇、DMSO處理后分別在第0天(D0)、第7天(D7)、第14天(D14)的相對數量分布。

圖2-1至圖2-3示出實施例3中KCP基因對紫杉醇誘導宮頸癌細胞功能研究結果,其中圖2-1示出細胞增殖抑制率測試結果,圖2-2示出細胞克隆能力測試結果,圖2-3示出細胞凋亡率測試結果。

具體實施方式

下面結合附圖,通過具體實施方式對本發明進一步詳細說明。通過這些說明,本發明的特點和優點將變得更為清楚明確。

對于本發明說明書和權利要求書中,提及基因序列,本領域技術人員應當理解,實際包括互補雙鏈的任意一條,或者兩條。為了方便,在本說明書和權利要求書中,雖然多數情況下至給出了一條鏈,但實際上也公開了與之互補的另一條鏈。例如提及KCP基因的DNA序列,實際上包括該序列以及其互補序列。例如,提及SEQ ID NO:1,實際包括其互補序列。本領域技術人員還可以理解,利用一條鏈可以檢測另一條鏈,反之亦然。

本申請中的基因序列包括DNA形式或RNA形式,公開其中一種,意味著另一種也被公開。例如提及KCP基因的DNA序列,實際也包括相應的RNA序列。

實施例1全基因組CRISPR/Cas9敲除技術篩選SiHa細胞中紫杉醇化療增敏基因

全基因組CRISPR/Cas9文庫慢病毒感染宮頸癌SiHa細胞,分別與紫杉醇化療藥物(藥物組)和DMSO溶劑(對照組)共培養7天及14天后,高通量測序分析結果(KCP轉錄本的RNA序列分別為SEQ ID NO:2(第一個)、SEQ ID NO:3(第二個)和SEQ ID NO:4(第三個)),選擇倍數變化(Fold Change,FC)、貝葉斯因子(Bayes Factor,BF)滿足以下篩選條件的基因作為候選基因。

篩選條件:

在藥物組中FCPaclitaxel≤-2,在對照組中|FCDMSO|<2;并且

在藥物組中BFPaclitaxel>2,在對照組中BFDMSO<0。

滿足上述篩選條件的基因說明該基因的敲除導致SiHa細胞對于紫杉醇藥物的敏感性增加,作為紫杉醇差異候選基因。

按上述方法共篩選出差異候選基因475個,包括7thday 101個,14thday 374個。紫杉醇差異候選基因相對sgRNA在不同時間點分布見圖1。

圖1所示的相對信號箱形圖表示高通量測序中的sgRNA頻率分布。Y軸表示在不同時間點每個細胞樣品的相對log2CPM(log2counts per million)?;揖€表示相對log2CPM的平均值,箱由下至上從第一四分位值延伸至第三四分位值,須表示1.5倍四分位距。

實施例2高內涵篩選(High Content Screening,HCS)(混合靶點、單靶點)敲除后增加紫杉醇化療敏感性基因

根據HCS mix的結果,挑選7個陽性基因的42個sgRNA靶點(每個基因6個靶點),抽提質粒,分別包裝成慢病毒,感染細胞,進入HCS單靶點篩選實驗,4ng/mL紫杉醇作用組與對照組(未加紫杉醇)比較,各組通過Celigo細胞計數分析增殖結果如下(見表1)。

表1.高內涵篩選(單靶點)紫杉醇增敏相關基因

注:帶有后綴“-4ng”表示加入4ng/ml紫杉醇藥物,不帶后綴表示為不加紫杉醇的對照組。

本輪高內涵篩選結果顯示:NC組(SiHa)細胞增殖正常,第五天相比第一天的增殖倍數達到7.93倍,加紫杉醇后NC組細胞的增殖受到抑制。在篩選的42個靶點中,選擇在4ng/mL紫杉醇作用下增敏倍數大于1.5的sgRNA靶點為后續待驗證的陽性靶點,其中KCP單靶點(05003-1)增敏倍數最高,進入后續細胞功能實驗,其中KCP05003-1靶點sgRNA序列為SEQID NO:5,擴增子序列為SEQ ID NO:6。

實施例3KCP基因對紫杉醇誘導宮頸癌細胞功能研究(針對上述KCP單靶點(05003-1))

正常目的細胞,以及加sgRNA陰性對照病毒感染和加KCP基因sgRNA病毒感染的細胞,進行紫杉醇藥物處理細胞(用“+”表示加入紫杉醇藥物)。加紫杉醇藥物1-5天,MTT檢測結果表明:相比sgCtrl+/sgCtrl組,sgKCP+/sgKCP組細胞對紫杉醇更敏感,增殖抑制明顯(P<0.05)(見圖2-1),細胞克隆能力明顯減弱(P<0.05)(見圖2-2),但細胞凋亡率無明顯差異(P>0.05)(見圖2-3)。

上述說明示出并描述了本發明的一種實例,但如前所述,應當理解本發明并非局限于本文所披露的形式,不應看作是對其他實施例的排除,而可用于各種其他組合、修改和環境,并能夠在本文所述發明構想范圍內,通過上述教導或相關領域的技術或知識進行改動。而本領域人員所進行的改動和變化不脫離本發明的精神和范圍,則都應在本發明所附加權利要求的保護范圍內。

以上結合優選實施方式和范例性實例對本發明進行了詳細說明。不過需要聲明的是,這些具體實施方式僅是對本發明的闡述性解釋,并不對本發明的保護范圍構成任何限制。在不超出本發明精神和保護范圍的情況下,可以對本發明技術內容及其實施方式進行各種改進、等價替換或修飾,這些均落入本發明的保護范圍內。本發明的保護范圍以所附權利要求為準。

序列表

<110> 首都醫科大學附屬北京婦產醫院

<120> KCP基因在宮頸癌紫杉醇敏感性檢測中的應用

<160> 6

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 2048

<212> DNA

<213> Homo sapiens

<400> 1

gagccgcgac gacagacggc gagccgagcg aggcggagct agcatggccg gggtcggggc 60

cgctgcgctg tcccttctcc tgcacctcgg ggccctggcg ctggccgcgg gcgcggaagg 120

tggggctgtc cccagggagc cccctgggca gcagacaact gcccattcct cagtccttgc 180

tgggaactcc caggagcagt ggcaccccct gcgagagtgg ctggggcgac tggaggctgc 240

agtgatggag ctcagagaac agaataagga cctgcagacg agggtgaggc agctggagtc 300

ctgtgagtgc caccctgcat ctccccagtg ctgggggctg gggcgtgcct ggcccgaggg 360

ggcacgctgg gagcctgacg cctgcacagc ctgcgtctgc caggatgggg ccgctcactg 420

tggcccccaa gcacacctgc cccattgcag gggctgcagc caaaatggcc agacctacgg 480

caacggggag accttctccc cagatgcctg caccacctgc cgctgtctgg aaggtaccat 540

cacttgcaac cagaagccat gcccaagagg accctgccct gagccaggag catgctgccc 600

gcactgtaag ccaggctgtg attatgaggg gcagctttat gaggaggggg tcaccttcct 660

gtccagctcc aacccttgtc tacagtgcac ctgcctgagg agccgagttc gctgcatggc 720

cctgaagtgc ccgcctagcc cctgcccaga gccagtgctg aggcctgggc actgctgccc 780

aacctgccaa ggctgcacag aaggtggctc tcactgggaa catggccaag agtggacaac 840

acctggggac ccctgccgaa tctgccggtg cctggagggt cacatccagt gccgccagcg 900

agaatgtgcc agcctgtgtc catacccagc ccggcccctc ccaggcacct gctgccctgt 960

gtgtgatggc tgtttcctaa acgggcggga gcaccgcagc ggggagcctg tgggctcagg 1020

ggacccctgc tcgcactgcc gctgtgctaa tgggagtgtc cagtgtgagc ctctgccctg 1080

cccgccagtg ccctgcagac acccaggcaa gatccctggg cagtgctgcc ctgtctgcga 1140

tggctgtgag taccagggac accagtatca gagccaggag accttcagac tccaagagcg 1200

gggcctctgt gtccgctgct cctgccaggc tggcgaggtc tcctgtgagg agcaggagtg 1260

cccagtcacc ccctgtgccc tgcctgcctc tggccgccag ctctgcccag cctgtgagct 1320

ggatggagag gagtttgctg agggagtcca gtgggagcct gatggtcggc cctgcaccgc 1380

ctgcgtctgt caagatgggg tacccaagtg cggggctgtg ctctgccccc cagccccctg 1440

ccagcacccc acccagcccc ctggtgcctg ctgccccagc tgtgacagct gcacctacca 1500

cagccaagtg tatgccaatg ggcagaactt cacggatgca gacagccctt gccatgcctg 1560

ccactgtcag gatggaactg tgacatgctc cttggttgac tgccctccca cgacctgtgc 1620

caggccccag agtggaccag gccagtgttg ccccaggtgc ccagactgca tcctggagga 1680

agaggtgttt gtggacggcg agagcttctc ccacccccga gacccctgcc aggagtgccg 1740

atgccaggaa ggccatgccc actgccagcc tcgcccctgc cccagggccc cctgtgccca 1800

cccgctgcct gggacctgct gcccgaacga ctgcagcggc tgtgcctttg gcgggaaaga 1860

gtaccccagc ggagcggact tcccccaccc ctctgacccc tgccgtctgt gtcgctgtct 1920

gagcggcaac gtgcagtgcc tggcccgccg ctgcgtgccg ctgccctgtc cagagcctgt 1980

cctgctgccg ggagagtgct gcccgcagtg cccagccgcc ccagcccccg ccggctgccc 2040

acggcccg 2048

<210> 2

<211> 2048

<212> DNA/RNA

<213> Homo sapiens

<400> 2

atggccgggg tcggggccgc tgcgctgtcc cttctcctgc acctcggggc cctggcgctg 60

gccgcgggcg cggaaggtgg ggctgtcccc agggagcccc ctgggcagca gacaactgcc 120

cattcctcag tccttgctgg gaactcccag gagcagtggc accccctgcg agagtggctg 180

gggcgactgg aggctgcagt gatggagctc agagaacaga ataaggacct gcagacgagg 240

gtgaggcagc tggagtcctg tgagtgccac cctgcatctc cccagtgctg ggggctgggg 300

cgtgcctggc ccgagggggc acgctgggag cctgacgcct gcacagcctg cgtctgccag 360

gatggggccg ctcactgtgg cccccaagca cacctgcccc attgcagggg ctgcagccaa 420

aatggccaga cctacggcaa cggggagacc ttctccccag atgcctgcac cacctgccgc 480

tgtctggaag gtaccatcac ttgcaaccag aagccatgcc caagaggacc ctgccctgag 540

ccaggagcat gctgcccgca ctgtaagcca ggctgtgatt atgaggggca gctttatgag 600

gagggggtca ccttcctgtc cagctccaac ccttgtctac agtgcacctg cctgaggagc 660

cgagttcgct gcatggccct gaagtgcccg cctagcccct gcccagagcc agtgctgagg 720

cctgggcact gctgcccaac ctgccaaggc tgcacagaag gtggctctca ctgggaacat 780

ggccaagagt ggacaacacc tggggacccc tgccgaatct gccggtgcct ggagggtcac 840

atccagtgcc gccagcgaga atgtgccagc ctgtgtccat acccagcccg gcccctccca 900

ggcacctgct gccctgtgtg tgatggctgt ttcctaaacg ggcgggagca ccgcagcggg 960

gagcctgtgg gctcagggga cccctgctcg cactgccgct gtgctaatgg gagtgtccag 1020

tgtgagcctc tgccctgccc gccagtgccc tgcagacacc caggcaagat ccctgggcag 1080

tgctgccctg tctgcgatgg ctgtgagtac cagggacacc agtatcagag ccaggagacc 1140

ttcagactcc aagagcgggg cctctgtgtc cgctgctcct gccaggctgg cgaggtctcc 1200

tgtgaggagc aggagtgccc agtcaccccc tgtgccctgc ctgcctctgg ccgccagctc 1260

tgcccagcct gtgagctgga tggagaggag tttgctgagg gagtccagtg ggagcctgat 1320

ggtcggccct gcaccgcctg cgtctgtcaa gatggggtac ccaagtgcgg ggctgtgctc 1380

tgccccccag ccccctgcca gcaccccacc cagccccctg gtgcctgctg ccccagctgt 1440

gacagctgca cctaccacag ccaagtgtat gccaatgggc agaacttcac ggatgcagac 1500

agcccttgcc atgcctgcca ctgtcaggat ggaactgtga catgctcctt ggttgactgc 1560

cctcccacga cctgtgccag gccccagagt ggaccaggcc agtgttgccc caggtgccca 1620

gactgcatcc tggaggaaga ggtgtttgtg gacggcgaga gcttctccca cccccgagac 1680

ccctgccagg agtgccgatg ccaggaaggc catgcccact gccagcctcg cccctgcccc 1740

agggccccct gtgcccaccc gctgcctggg acctgctgcc cgaacgactg cagcggctgt 1800

gcctttggcg ggaaagagta ccccagcgga gcggacttcc cccacccctc tgacccctgc 1860

cgtctgtgtc gctgtctgag cggcaacgtg cagtgcctgg cccgccgctg cgtgccgctg 1920

ccctgtccag agcctgtcct gctgccggga gagtgctgcc cgcagtgccc agccgcccca 1980

gcccccgccg gctgcccacg gcccggcgcg gcccacgccc gccaccagga gtacttctcc 2040

ccgcccgg 2048

<210> 3

<211> 2048

<212> DNA/RNA

<213> Homo sapiens

<400> 3

atggccgggg tcggggccgc tgcgctgtcc cttctcctgc acctcggggc cctggcgctg 60

gccgcgggcg cggaaggtgg ggctgtcccc agggagcccc ctgggcagca gacaactgcc 120

cattcctcag tccttgctgg gaactcccag gagcagtggc accccctgcg agagtggctg 180

gggcgactgg aggctgcagt gatggagctc agagaacaga ataaggacct gcagacgagg 240

gtgaggcagc tggagtcctg tgagtgccac cctgcatctc cccagtgctg ggggctgggg 300

cgtgcctggc ccgagggggc acgctgggag cctgacgcct gcacagcctg cgtctgccag 360

gatggggccg ctcactgtgg cccccaagca cacctgcccc attgcagggg ctgcagccaa 420

aatggccaga cctacggcaa cggggagacc ttctccccag atgcctgcac cacctgccgc 480

tgtctggaag gtaccatcac ttgcaaccag aagccatgcc caagaggacc ctgccctgag 540

ccaggagcat gctgcccgca ctgtaagcca ggctgtgatt atgaggggca gctttatgag 600

gagggggtca ccttcctgtc cagctccaac ccttgtctac agtgcacctg cctgaggagc 660

cgagttcgct gcatggccct gaagtgcccg cctagcccct gcccagagcc agtgctgagg 720

cctgggcact gctgcccaac ctgccaaggc tgcacagaag gtggctctca ctgggaacat 780

ggccaagagt ggacaacacc tggggacccc tgccgaatct gccggtgcct ggagggtcac 840

atccagtgcc gccagcgaga atgtgccagc ctgtgtccat acccagcccg gcccctccca 900

ggcacctgct gccctgtgtg tgatggctgt ttcctaaacg ggcgggagca ccgcagcggg 960

gagcctgtgg gctcagggga cccctgctcg cactgccgct gtgctaatgg gagtgtccag 1020

tgtgagcctc tgccctgccc gccagtgccc tgcagacacc caggcaagat ccctgggcag 1080

tgctgccctg tctgcgatgg ctgtgagtac cagggacacc agtatcagag ccaggagacc 1140

ttcagactcc aagagcgggg cctctgtgtc cgctgctcct gccaggctgg cgaggtctcc 1200

tgtgaggagc aggagtgccc agtcaccccc tgtgccctgc ctgcctctgg ccgccagctc 1260

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gacagctgca cctaccacag ccaagtgtat gccaatgggc agaacttcac ggatgcagac 1500

agcccttgcc atgcctgcca ctgtcaggat ggaactgtga catgctcctt ggttgactgc 1560

cctcccacga cctgtgccag gccccagagt ggaccaggcc agtgttgccc caggtgccca 1620

gactgcatcc tggaggaaga ggtgtttgtg gacggcgaga gcttctccca cccccgagac 1680

ccctgccagg agtgccgatg ccaggaaggc catgcccact gccagcctcg cccctgcccc 1740

agggccccct gtgcccaccc gctgcctggg acctgctgcc cgaacgactg cagcggctgt 1800

gcctttggcg ggaaagagta ccccagcgga gcggacttcc cccacccctc tgacccctgc 1860

cgtctgtgtc gctgtctgag cggcaacgtg cagtgcctgg cccgccgctg cgtgccgctg 1920

ccctgtccag agcctgtcct gctgccggga gagtgctgcc cgcagtgccc agccgcccca 1980

gcccccgccg gctgcccacg gcccggcgcg gcccacgccc gccaccagga gtacttctcc 2040

ccgcccgg 2048

<210> 4

<211> 2048

<212> DNA/RNA

<213> Homo sapiens

<400> 4

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tgtctggaag gtaccatcac ttgcaaccag aagccatgcc caagaggacc ctgccctgag 540

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gagggggtca ccttcctgtc cagctccaac ccttgtctac agtgcacctg cctgaggagc 660

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cctgggcact gctgcccaac ctgccaaggc tgcacagaag gtggctctca ctgggaacat 780

ggccaagagt ggacaacacc tggggacccc tgccgaatct gccggtgcct ggagggtcac 840

atccagtgcc gccagcgaga atgtgccagc ctgtgtccat acccagcccg gcccctccca 900

ggcacctgct gccctgtgtg tgatggctgt ttcctaaacg ggcgggagca ccgcagcggg 960

gagcctgtgg gctcagggga cccctgctcg cactgccgct gtgctaatgg gagtgtccag 1020

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tgccccccag ccccctgcca gcaccccacc cagccccctg gtgcctgctg ccccagctgt 1440

gacagctgca cctaccacag ccaagtgtat gccaatgggc agaacttcac ggatgcagac 1500

agcccttgcc atgcctgcca ctgtcaggat ggaactgtga catgctcctt ggttgactgc 1560

cctcccacga cctgtgccag gccccagagt ggaccaggcc agtgttgccc caggtgccca 1620

gactgcatcc tggaggaaga ggtgtttgtg gacggcgaga gcttctccca cccccgagac 1680

ccctgccagg agtgccgatg ccaggaaggc catgcccact gccagcctcg cccctgcccc 1740

agggccccct gtgcccaccc gctgcctggg acctgctgcc cgaacgactg cagcggctgt 1800

gcctttggcg ggaaagagta ccccagcgga gcggacttcc cccacccctc tgacccctgc 1860

cgtctgtgtc gctgtctgag cggcaacgtg cagtgcctgg cccgccgctg cgtgccgctg 1920

ccctgtccag agcctgtcct gctgccggga gagtgctgcc cgcagtgccc agccgcccca 1980

gcccccgccg gctgcccacg gcccggcgcg gcccacgccc gccaccagga gtacttctcc 2040

ccgcccgg 2048

<210> 5

<211> 20

<212> DNA/RNA

<213> Homo sapiens

<400> 5

ggactcacct tccgcgcccg 20

<210> 6

<211> 168

<212> DNA/RNA

<213> Homo sapiens

<400> 6

tgcgctgtcc cttctcctgc acctcggggc cctggcgctg gccgcgggcg cggaaggtga 60

gtccaggtgc gggaggcttg gggtccggcc aggtgcgccc cctccctcct atcagcccgg 120

cctgaggggg ccgagagggg ctgggggctc tgctcttagc cctgcctg 168

再多了解一些
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網友詢問留言 已有1條留言
  • 訪客 來自[重慶市電信] 2019年07月12日 11:19
    哥哥
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